Kit RNAprep Pure Micro

Para la purificación de ARN total de alta calidad a partir de microcantidades de tejidos o células.

El RNAprep Pure Micro Kit utiliza una columna de adsorción centrífuga específica de ácido nucleico altamente eficiente y un sistema de tampón único para extraer rápidamente el ARN total de una amplia gama de diferentes tipos de micromuestras. Este kit incluye Carrier RNA, que puede capturar fácilmente trazas de ácidos nucleicos del sistema. La extracción de ARN con este kit es conveniente, rápida y reproducible con alto rendimiento. La reacción se puede completar en 30-40 minutos. El kit puede eliminar selectivamente todo el ARN que sea <200 nt (ARNr 5.8S, ARNr 5S y ARNt, etc.), mientras enriquece, aísla y purifica todo el ARN que es> 200 nt. El ARN total extraído es extremadamente puro y está libre de contaminación de ADN y proteínas.

Gato. No	Tamaño de embalaje
4992859	50 preparaciones

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Características

■ Capaz de purificar ARN de alta calidad a partir de muestras de trazas, como tejido micro-disecado, tejido fibroso y células.
■ La DNasa I única minimiza la contaminación del ADN genómico.
■ El ARN de alta pureza y listo para usar es adecuado para aplicaciones sensibles posteriores.
■ No se necesita extracción de fenol / cloroformo, ni precipitación de LiCl y etanol, ni centrifugación en gradiente de CsCl, lo que hace que el proceso sea seguro y confiable.

Aplicaciones

■ RT-PCR.
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ PCR en tiempo real.
■ Análisis de viruta.
■ Detección de poliA, traducción in vitro, análisis de protección de ARNasa y clonación molecular.

Todos los productos se pueden personalizar para ODM / OEM. Para detalles,haga clic en Servicio personalizado (ODM / OEM)

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ARN total de 1 × 10⁶, 1 × 10⁵, 1 × 10⁴, 1 × 10³, 1 × 10²Se extrajeron 10 células Hela usando el kit RNAprep Pure Micro. La RT-qPCR se realizó usando el kit Quant qRT-PCR (SYBR Green) de TIANGEN.

P: bloqueo de columna

La lisis u homogeneización celular A-1 no es suficiente

---- Reduzca el uso de muestras, aumente la cantidad de tampón de lisis, aumente el tiempo de homogeneización y lisis.

A-2 La cantidad de muestra es demasiado grande

---- Reduzca la cantidad de muestra utilizada o aumente la cantidad de tampón de lisis.

P: bajo rendimiento de ARN

A-1 Lisis u homogeneización celular insuficiente

---- Reduzca el uso de muestras, aumente la cantidad de tampón de lisis, aumente el tiempo de homogeneización y lisis.

A-2 La cantidad de muestra es demasiado grande

---- Consulte la capacidad máxima de procesamiento.

El ARN A-3 no se eluye completamente de la columna.

---- Después de agregar agua libre de ARNasa, déjela por unos minutos antes de centrifugar.

A-4 Etanol en el eluyente

---- Después del enjuague, centrifugue nuevamente y retire el tampón de lavado tanto como sea posible.

El medio de cultivo celular A-5 no se elimina por completo

---- Al recolectar células, asegúrese de eliminar el medio de cultivo tanto como sea posible.

A-6 Las células almacenadas en RNAstore no se centrifugan eficazmente

---- La densidad de almacenamiento de ARN es mayor que el medio de cultivo celular promedio; por lo que debe aumentarse la fuerza centrífuga. Se sugiere centrifugar a 3000x g.

A-7 Bajo contenido de ARN y abundancia en la muestra

---- Utilice una muestra positiva para determinar si el bajo rendimiento es causado por la muestra.

Q: degradación del ARN

A-1 El material no es fresco

---- Los tejidos frescos deben almacenarse en nitrógeno líquido inmediatamente o colocarse inmediatamente en el reactivo RNAstore para asegurar el efecto de extracción.

A-2 La cantidad de muestra es demasiado grande

---- Reducir la cantidad de muestra.

Contaminación por ARNasa A-3n

---- Aunque el tampón provisto en el kit no contiene RNasa, es fácil contaminar la RNasa durante el proceso de extracción y debe manipularse con cuidado.

A-4 Contaminación por electroforesis

---- Reemplace el tampón de electroforesis y asegúrese de que los consumibles y el tampón de carga estén libres de contaminación por ARNasa.

A-5 Demasiada carga para electroforesis

---- Reduzca la cantidad de carga de muestra, la carga de cada pocillo no debe exceder los 2 μg.

P: contaminación por ADN

A-1 La cantidad de muestra es demasiado grande

---- Reducir la cantidad de muestra.

A-2 Algunas muestras tienen un alto contenido de ADN y pueden tratarse con DNasa.

---- Realice un tratamiento con ADNasa sin ARNasa en la solución de ARN obtenida, y el ARN se puede usar directamente para experimentos posteriores después del tratamiento, o se puede purificar aún más mediante kits de purificación de ARN.

P: ¿Cómo eliminar la ARNasa de los consumibles y artículos de vidrio experimentales?

Para cristalería, horneado a 150 ° C durante 4 h. Para recipientes de plástico, sumergir en 0,5 M NaOH durante 10 min, luego enjuagar bien con agua libre de ARNasa y luego esterilizar para eliminar por completo la ARNasa. Los reactivos o soluciones utilizados en el experimento, especialmente el agua, deben estar libres de RNasa. Utilice agua libre de ARNasa para todas las preparaciones de reactivos (agregue agua a una botella de vidrio limpia, agregue DEPC a una concentración final de 0.1% (V / V), agite durante la noche y esterilice en autoclave).

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