Kit de ARN total RNAsimple

Para la extracción de ARN total de alta eficiencia utilizando la columna centrífuga ampliamente utilizada.

El kit de ARN total RNAsimple adopta un nuevo método de extracción de ARN basado en el método de isotiocianato de guanidinio / fenol. El Buffer RZ diseñado específicamente por TIANGEN puede eliminar el ADN genómico y las proteínas de las células de manera rápida y eficiente, haciendo que el ARN obtenido sea altamente puro y estable.
Este kit se utiliza para separar el ARN total de sangre, células animales, tejidos y tejidos vegetales. Cada columna de centrifugado puede procesar 50-100 mg de tejido o 5 × 10⁶células a la vez y puede procesar una gran cantidad de muestras diferentes simultáneamente. La reacción se puede completar en menos de una hora, y el ARN total extraído tiene un mayor rendimiento, mejor pureza, sin contaminación de ADN ni proteínas, y se puede utilizar en varios experimentos posteriores.

Gato. No	Tamaño de embalaje
4992858	50 preparaciones

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Flujo de trabajo

Ejemplo experimental

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Características

■ El ARN de alta pureza listo para usar es adecuado para aplicaciones sensibles posteriores.
■ Amplias aplicaciones: el ARN purificado se puede aplicar a varias muestras experimentales.
■ El experimento se puede completar en 1 hora con operaciones simples.

Aplicaciones

■ RT-PCR
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ PCR en tiempo real
■ Detección de poliA, traducción in vitro, análisis de protección de ARNasa, clonación molecular.

Todos los productos se pueden personalizar para ODM / OEM. Para detalles,haga clic en Servicio personalizado (ODM / OEM)

Anterior: Kit de RNAclean

Próximo: Kit RNAprep Pure Micro

Material: 20 mg de tejido de bazo de rata
Método: El ARN total de tejido de bazo de rata se aisló usando el kit RNAsimple Total RNA.
Resultados: Consulte la imagen de electroforesis en gel de agarosa anterior. Se cargaron 2-4 µl de 100 µl de eluidos por carril. La electroforesis se realizó a 6 V / cm durante 30 min en agarosa al 1%.

P: bloqueo de columna

La lisis u homogeneización celular A-1 no es suficiente

---- Reduzca el uso de muestras, aumente la cantidad de tampón de lisis, aumente el tiempo de homogeneización y lisis.

A-2 La cantidad de muestra es demasiado grande

---- Reduzca la cantidad de muestra utilizada o aumente la cantidad de tampón de lisis.

P: bajo rendimiento de ARN

A-1 Lisis u homogeneización celular insuficiente

---- Reduzca el uso de muestras, aumente la cantidad de tampón de lisis, aumente el tiempo de homogeneización y lisis.

A-2 La cantidad de muestra es demasiado grande

---- Consulte la capacidad máxima de procesamiento.

El ARN A-3 no se eluye completamente de la columna.

---- Después de agregar agua libre de ARNasa, déjela por unos minutos antes de centrifugar.

A-4 Etanol en el eluyente

---- Después del enjuague, centrifugue nuevamente y retire el tampón de lavado tanto como sea posible.

El medio de cultivo celular A-5 no se elimina por completo

---- Al recolectar células, asegúrese de eliminar el medio de cultivo tanto como sea posible.

A-6 Las células almacenadas en RNAstore no se centrifugan eficazmente

---- La densidad de almacenamiento de ARN es mayor que el medio de cultivo celular promedio; por lo que debe aumentarse la fuerza centrífuga. Se sugiere centrifugar a 3000x g.

A-7 Bajo contenido de ARN y abundancia en la muestra

---- Utilice una muestra positiva para determinar si el bajo rendimiento es causado por la muestra.

Q: degradación del ARN

A-1 El material no es fresco

---- Los tejidos frescos deben almacenarse en nitrógeno líquido inmediatamente o colocarse inmediatamente en el reactivo RNAstore para asegurar el efecto de extracción.

A-2 La cantidad de muestra es demasiado grande

---- Reducir la cantidad de muestra.

Contaminación por ARNasa A-3n

---- Aunque el tampón provisto en el kit no contiene RNasa, es fácil contaminar la RNasa durante el proceso de extracción y debe manipularse con cuidado.

A-4 Contaminación por electroforesis

---- Reemplace el tampón de electroforesis y asegúrese de que los consumibles y el tampón de carga estén libres de contaminación por ARNasa.

A-5 Demasiada carga para electroforesis

---- Reduzca la cantidad de carga de muestra, la carga de cada pocillo no debe exceder los 2 μg.

P: contaminación por ADN

A-1 La cantidad de muestra es demasiado grande

---- Reducir la cantidad de muestra.

A-2 Algunas muestras tienen un alto contenido de ADN y pueden tratarse con DNasa.

---- Realice un tratamiento con ADNasa sin ARNasa en la solución de ARN obtenida, y el ARN se puede usar directamente para experimentos posteriores después del tratamiento, o se puede purificar aún más mediante kits de purificación de ARN.

P: ¿Cómo eliminar la ARNasa de los consumibles y artículos de vidrio experimentales?

Para cristalería, horneado a 150 ° C durante 4 h. Para recipientes de plástico, sumergir en 0,5 M NaOH durante 10 min, luego enjuagar bien con agua libre de ARNasa y luego esterilizar para eliminar por completo la ARNasa. Los reactivos o soluciones utilizados en el experimento, especialmente el agua, deben estar libres de RNasa. Utilice agua libre de ARNasa para todas las preparaciones de reactivos (agregue agua a una botella de vidrio limpia, agregue DEPC a una concentración final de 0.1% (V / V), agite durante la noche y esterilice en autoclave).

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