Kit de tejido puro RNAprep

Para la purificación de hasta 100 μg de ARN total de tejidos animales.

El kit RNAprep Pure Tissue proporciona un método rápido, simple y rentable para la purificación del ARN total de los tejidos animales mediante el uso de una columna de giro eficaz y un sistema de tampón único. El kit incluye columnas de centrifugación CR3 sin ARNasa para purificar ARN de alta calidad mediante el uso de tecnología de membrana de sílice. Se podría obtener ARN total de alta calidad en 40-50 minutos con alta pureza y sin contaminación de proteínas ni ADN genómico.

Gato. No	Tamaño de embalaje
4992236	50 preparaciones

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Características

■ Los tampones optimizados para tejidos animales hacen que el proceso sea simple y conveniente.
■ La DNasa I única minimiza la contaminación del ADN genómico.
■ El ARN de mayor pureza y listo para usar es adecuado para aplicaciones sensibles posteriores.
■ No se necesita extracción de fenol / cloroformo, precipitación de LiCl y etanol, ni centrifugación en gradientes de CsCl, lo que hace que el proceso sea seguro y confiable.

Aplicaciones

■ RT-PCR.
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ PCR en tiempo real.
■ Análisis de viruta.
■ Detección de poliA, traducción in vitro, análisis de protección de ARNasa y clonación molecular.

Todos los productos se pueden personalizar para ODM / OEM. Para detalles,haga clic en Servicio personalizado (ODM / OEM)

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Material: 20 mg de embrión (13 días), 15 mg de riñón, 10 mg de hígado, 15 mg de bazo, 10 mg de timo, 20 mg de pulmón
Método: Se purificó el ARN total de diferentes muestras de tejido de rata utilizando el kit RNAprep Pure Tissue.
Resultados: La imagen de electroforesis en gel de agarosa se muestra arriba. Se cargaron 2-4 µl de 100 µl de eluidos por carril.
M: marcador III de ADN de TIANGEN;
Carril 1-2: Embrión (13 días); Carril 3: Riñón; Carril 4-6: hígado; Carril 7: bazo; Carril 8: timo; Carril 9: Pulmón.
La electroforesis se realizó a 6 V / cm durante 30 min en gel de agarosa al 1%.

P: bloqueo de columna

La lisis u homogeneización celular A-1 no es suficiente

---- Reduzca el uso de muestras, aumente la cantidad de tampón de lisis, aumente el tiempo de homogeneización y lisis.

A-2 La cantidad de muestra es demasiado grande

---- Reduzca la cantidad de muestra utilizada o aumente la cantidad de tampón de lisis.

P: bajo rendimiento de ARN

A-1 Lisis u homogeneización celular insuficiente

---- Reduzca el uso de muestras, aumente la cantidad de tampón de lisis, aumente el tiempo de homogeneización y lisis.

A-2 La cantidad de muestra es demasiado grande

---- Consulte la capacidad máxima de procesamiento.

El ARN A-3 no se eluye completamente de la columna.

---- Después de agregar agua libre de ARNasa, déjela por unos minutos antes de centrifugar.

A-4 Etanol en el eluyente

---- Después del enjuague, centrifugue nuevamente y retire el tampón de lavado tanto como sea posible.

El medio de cultivo celular A-5 no se elimina por completo

---- Al recolectar células, asegúrese de eliminar el medio de cultivo tanto como sea posible.

A-6 Las células almacenadas en RNAstore no se centrifugan eficazmente

---- La densidad de almacenamiento de ARN es mayor que el medio de cultivo celular promedio; por lo que debe aumentarse la fuerza centrífuga. Se sugiere centrifugar a 3000x g.

A-7 Bajo contenido de ARN y abundancia en la muestra

---- Utilice una muestra positiva para determinar si el bajo rendimiento es causado por la muestra.

Q: degradación del ARN

A-1 El material no es fresco

---- Los tejidos frescos deben almacenarse en nitrógeno líquido inmediatamente o colocarse inmediatamente en el reactivo RNAstore para asegurar el efecto de extracción.

A-2 La cantidad de muestra es demasiado grande

---- Reducir la cantidad de muestra.

Contaminación por ARNasa A-3n

---- Aunque el tampón provisto en el kit no contiene RNasa, es fácil contaminar la RNasa durante el proceso de extracción y debe manipularse con cuidado.

A-4 Contaminación por electroforesis

---- Reemplace el tampón de electroforesis y asegúrese de que los consumibles y el tampón de carga estén libres de contaminación por ARNasa.

A-5 Demasiada carga para electroforesis

---- Reduzca la cantidad de carga de muestra, la carga de cada pocillo no debe exceder los 2 μg.

P: contaminación por ADN

A-1 La cantidad de muestra es demasiado grande

---- Reducir la cantidad de muestra.

A-2 Algunas muestras tienen un alto contenido de ADN y pueden tratarse con DNasa.

---- Realice un tratamiento con ADNasa sin ARNasa en la solución de ARN obtenida, y el ARN se puede usar directamente para experimentos posteriores después del tratamiento, o se puede purificar aún más mediante kits de purificación de ARN.

P: ¿Cómo eliminar la ARNasa de los consumibles y artículos de vidrio experimentales?

Para cristalería, horneado a 150 ° C durante 4 h. Para recipientes de plástico, sumergir en 0,5 M NaOH durante 10 min, luego enjuagar bien con agua libre de ARNasa y luego esterilizar para eliminar por completo la ARNasa. Los reactivos o soluciones utilizados en el experimento, especialmente el agua, deben estar libres de RNasa. Utilice agua libre de ARNasa para todas las preparaciones de reactivos (agregue agua a una botella de vidrio limpia, agregue DEPC a una concentración final de 0.1% (V / V), agite durante la noche y esterilice en autoclave).

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